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垂直電泳槽(雙板/四板)操作全解析：從灌膠到轉(zhuǎn)印的避坑手冊
以下是天津本生 垂直電泳槽(雙板/四板)全流程操作解析及避坑指南，綜合結(jié)構(gòu)差異與實(shí)驗(yàn)優(yōu)化要點(diǎn)：
一、?灌膠階段關(guān)鍵操作?
玻璃板組裝?
雙板槽需手動對齊玻璃板并密封橡膠框，四板槽采用凸輪卡鎖制膠框快速對齊;
玻璃板傾斜20°安裝(薄板略高于厚板)可有效防漏膠。
凝膠配制?
分離膠?：灌膠后覆蓋去離子水或無水乙醇壓平界面，避免波浪狀條帶;
濃縮膠?：插入梳子后需補(bǔ)膠，防止凝固收縮導(dǎo)致上樣孔變形。
防漏膠技巧?
檢查橡膠墊老化情況，優(yōu)先選用高粘性軟墊;
四板槽需確保實(shí)驗(yàn)臺絕對水平，避免多膠同步漏液。
二、?電泳運(yùn)行優(yōu)化?
問題? ?原因? ?解決方案?
條帶扭曲 電場不均或緩沖液陳舊 預(yù)電泳5分鐘平衡電場，更換新鮮緩沖液
內(nèi)槽漏液 密封條老化或玻璃板未壓緊 更換密封條，雙手斜角位均勻擰緊螺絲
電泳速度過慢 電壓設(shè)置過低(雙板槽<200V) 四板槽可調(diào)至150V同步運(yùn)行4塊膠
三、?轉(zhuǎn)印環(huán)節(jié)避坑要點(diǎn)?
膜處理?
PVDF膜需甲醇激活30秒，NC膜直接浸潤轉(zhuǎn)印緩沖液;
大蛋白(>100kDa)用0.45μm膜，小蛋白選0.22μm。
三明治組裝?
濾紙/膜/膠疊放后需用玻璃棒滾動排氣泡;
四板槽轉(zhuǎn)印時(shí)需獨(dú)立檢查每塊膠的轉(zhuǎn)印方向。
參數(shù)設(shè)置?
常規(guī)轉(zhuǎn)印條件：100V恒壓1小時(shí)(需冰浴);
高分子量蛋白建議降電壓至80V延長至2小時(shí)。
四、?維護(hù)與故障處理?
電極維護(hù)?：每月用10%醋酸浸泡鉑金絲10分鐘除鹽結(jié)晶;
漏液應(yīng)急?：立即斷電，用瓊脂封堵縫隙后重啟;
冷卻系統(tǒng)?：四板槽優(yōu)先選集成散熱設(shè)計(jì)，雙板槽需外接循環(huán)水(15-20℃)。
通過規(guī)范操作與針對性優(yōu)化，可顯著提升垂直電泳的穩(wěn)定性和重復(fù)性。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)通量、預(yù)算及操作復(fù)雜度綜合選擇，可參考廠商提供的兼容性參數(shù)(如天津本生雙板 BS-mini01 和四板 BS-mini04 )。
BS-300 基礎(chǔ)性電泳儀電源
BS-600C 通用型電泳儀電源
BS-mini01 垂直電泳槽(雙板)
BS-mini04 垂直電泳槽(四板)
BS-ZY03 轉(zhuǎn)印電泳槽(WB雙板和鉑樂通用)
BS-ZY04 轉(zhuǎn)印電泳槽 (WB四板)
BS-sub02 瓊脂糖電泳槽
注：以上資料僅供參考，具體請咨詢技術(shù)老師。
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